耶鲁大学陈斯迪、南京大学叶露鹏等在 Nature Biotechnology 期刊发表了题为：In vivo AAV–SB-CRISPR screens of tumor-infiltrating primary NK cells identify genetic checkpoints of CAR-NK therapy 的研究论文。

研究团队历经多年的技术攻关，利用AAV-转座子系统将CRISPR文库整合到基因组中，克服了原代NK细胞转导和基因编辑效率低的障碍。研究通过四个平行的CRISPR筛选实验以及单细胞测序数据，发现了一个全新靶点——CALHM2，为NK细胞肿瘤免疫提供了新的治疗靶点。

在这项研究中，研究团队利用AAV-转座子技术高效整合CRISPR文库到原代NK细胞基因组中，并在四种不同的肿瘤模型中进行体内高通量基因筛选。同时，团队利用单细胞RNA测序（scRNA-seq）描绘肿瘤浸润NK细胞亚群和转录组图谱。

值得注意的是，两组实验发现了一个唯一共同的NK新靶点——CALHM2，敲除CALHM2的NK细胞具有更强的杀伤性和肿瘤浸润能力，CALHM2的mRNA能够逆转CALHM2敲除的NK细胞的表型。在人原代NK细胞中，CALHM2敲除增强了它们的细胞毒性、脱颗粒和细胞因子的产生。在对CAR-NK细胞具有抵抗力的实体瘤模型中，CALHM2敲除的CAR-NK细胞在体内显示出强大的抗肿瘤效果。

总的来说，该研究发现了一个NK细胞的全新检查点——CALHM2，并展示了通过敲除CALHM2来构建增强型NK细胞疗法的潜力。